迈尔斯（沙梅克·摩尔 配音）的父亲是一位一板一眼的警官，而他的母亲则是一名工作勤奋的护士慈爱的父母对于孩子的成就非常自豪，也希望他能够融入新加入的这所优秀的学校，在这里取得成功。然而迈尔斯的生活因为一次意外变得更加复杂。他被一只放射性蜘蛛咬伤，并因此获得了毒液冲击、伪装隐藏、蜘蛛爬行、超凡听力、蜘蛛感应等一系列超能力。与此同时，这座城市里最臭名昭着的犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 配音）已经建立起一台高度隐秘的超级对撞机，这台对撞机开启了通往其他宇宙的时空通道，来自其他宇宙、不同版本的蜘蛛侠（包括中年彼得·帕克、女蜘蛛侠格温、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠和潘妮·帕克）也来到了迈尔斯所在的世界。在这些新老角色的帮助下，迈尔斯慢慢学习、逐渐接受挑战，也学会了作为一名超级英雄所要承担的责任。他最终意识到，任何人都可以戴上超级英雄的面具，为正义而战……